Allmän Information - COOK Medical IVF Media Instructions For Use Manual

BRUKSANVISNING
• Aseptisk teknik ska användas.
• Gametbuffert är lämplig för både öppen odling och mikroodling. Om mikrodroppar
används, säkerställ att mineralolja (K-SICO) används för att undvika avdunstning.
• Värm gametbufferten till 37 °C före användning.
SYDNEY IVF SPERMAGRADIENT K SISG 20 & K SISG 50
AVSEDD ANVÄNDNING
Spermagradientsatsen används för att separera spermier baserat på densitet med användning
av densitetgradientslösningar.
ALLMÄN INFORMATION
Lösningarna har kompletterats med humant serumalbumin (10 mg/mL) och gentamicin
(0,01 mg/mL).
Klar att använda efter ekvilibrering till 37 °C.
FÖRVARING OCH STABILITET
Spermagradientsatsen måste förvaras i den ursprungliga oöppnade behållaren i kylskåp vid
2-8 °C. Får ej frysas.
BRUKSANVISNING
• Aseptisk teknik ska användas.
• Sädesvätskan ska bearbetas inom en timme efter insamlingen.
• Gradienterna ska förberedas omedelbart före användningen.
• Obehandlad sädesvätska får aldrig centrifugeras.
• Låt sädesvätskan anta vätskeform vid 37 °C under 30 minuter.
• Värm spermagradientsatsen till 37 °C under minst fyra timmar före användning.
• Förbered två gradienter genom att tillsätta 1,5 mL 40 % med 1,5 mL 80 % underst i
konbottnade rör.
• Ladda 60 % eller upp till 2,0 mL av ejakulatet på en gradient och 40 % eller upp till 1,2 mL av
ejakulatet till den andra gradienten.
• Centrifugera 20 minuter vid 300 G och avlägsna sedan seminalplasman, det övre gränsskiktet,
40 %-skiktet och det nedre gränsskiktet försiktigt. Lämna det kvarstående 80 %-skiktet intakt.
• Hämta upp spermapelleten med användning av en ren Pasteurpipett och resuspendera i
3 mL gametbuffert (K-SIGB).
• Centrifugera under 10 minuter vid 600 G.
• Upprepa tvättsteget i ytterligare 3 mL gametbuffert (K-SIGB).
• Avlägsna supernatanten och resuspendera pelleten i en liten volym (ungefär 200 μL)
spermamedium (K-SISM) eller befruktningsmedium (K-SIFM).
• Räkna spermierna och beräkna koncentrationen. Justera enligt behov.
• Förvara i en 6 % CO -inkubator vid 37 °C tills användning.
2
SYDNEY IVF SPERMIENT K SISP 20 & K SISP 100
AVSEDD ANVÄNDNING
Spermient används för att separera spermier baserat på densitet med användning av
densitetgradientslösningar.
169