COOK Medical IVF Media Instructions For Use Manual page 155

ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ: компоненты набора для витрификации бластоцист не
готовы к использованию. Конечный пользователь перед применением должен
смешать определенные растворы для витрификации. Раствор для витрификации
4 представляет собой диметилсульфоксид (DMSO). Паспорт безопасности вещества
(MSDS) предоставляется по запросу.
Данный набор должен использоваться с разрешенным находящимся в продаже
устройством для хранения, предназначенным для использования в процедурах
витрификации бластоцист. Устройство для хранения должно представлять собой
закрытую систему для уменьшения потенциального риска вирусной контаминации,
существующего при работе с открытыми системами.
ОПИСАНИЕ НАБОРА
Состав этих трех культуральных сред соответствует буферу Cryobase (среда с буфером
HEPES 10 мM, содержащая 20,0 мг/мл сывороточного альбумина человека и 0,01 мг/мл
гентамицина). Раствор 1 содержит только буфер Cryobase. Раствор 2 используется
для подготовки к витрификации и содержит буфер Cryobase с 8% этиленгликоля и
8% DMSO. Раствор 3 используется для криоконсервации и содержит буфер Cryobase с
0,68 M трегалозы, 16% этиленгликоля и 16% DMSO. Раствор 4 представляет собой DMSO,
упакованный в стеклянный флакон.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Набор для витрификации бластоцист должен храниться в оригинальном невскрытом
контейнере в холодильнике при температуре 2–8 °C.
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ
Подготовка к работе
• Соблюдайте правила асептики.
• При температуре 2–8 °C DMSO находится в твердом состоянии. Перед использованием
следует довести раствор для витрификации 4 (DMSO) до комнатной температуры.
• Добавьте 400 мкл раствора для витрификации 4 (DMSO) к 4,6 мл раствора для
витрификации 2 и хорошо размешайте.
• Добавьте 1 мл раствора для витрификации 4 (DMSO) к 5,25 мл раствора для
витрификации 3 и хорошо размешайте.
• Подготовьте растворы для витрификации в 4-луночном планшете – добавьте по 800 мкл
раствора для витрификации 1 в лунки 1 и 2, 800 мкл подготовленного раствора для
витрификации 2 в лунку 3 и 800 мкл подготовленного раствора для витрификации 3 в лунку 4.
• Прежде чем использовать три раствора для витрификации, доведите их температуру
до 37 °C.
Метод
• Поместите эмбрион(ы), подлежащий(ие) криоконсервации в лунку 1 (до 3 эмбрионов).
• Переместите эмбрион, который будет витрифицирован, в лунку 2. Подготовьте
устройство витрификации. Эмбрион должен находиться в лунке не более 1 минуты.
• Переместите эмбрион в лунку 3 на две минуты.
• Переместите эмбрион в лунку 4. Выполните следующий этап в течение 20–30 секунд.
• При помощи пипетки с вытеснением положительным давлением аспирируйте эмбрион
в 1,5 мкл раствора. Избегайте накопления пузырьков.
• Высвободите каплю с эмбрионом в устройство витрификации и немедленно выполните
витрификацию, используя утвержденный в лаборатории метод.
155