COOK Medical IVF Media Instructions For Use Manual page 119

SPERMIENT SYDNEY IVF K SISP 20 I K SISP 100
PRZEZNACZENIE
Spermient służy do rozdzielania spermy na podstawie gęstości, za pomocą roztworów z
gradientem stężeń.
INFORMACJE OGÓLNE
Spermient jest suplementowany ludzką albuminą osocza (10 mg/mL) i gentamycyną
(0,01 mg/mL).
Gotowy do użycia po zrównoważeniu do 37 °C.
PRZECHOWYWANIE I STABILNOŚĆ
Spermient musi być przechowywany w oryginalnym, nieotwartym pojemniku, schłodzonym
do temperatury 2-8 °C. Nie zamrażać.
INSTRUKCJA UŻYCIA
• Należy przestrzegać zasad aseptyki.
• Nasienie należy poddać procesom w ciągu jednej godziny od pobrania.
• Spermient musi zostać rozcieńczony buforem do gamet (K-SIGB) do odpowiedniego stężenia
do przygotowania spermy (np. gradienty 40% i 80%).
• Gradienty należy przygotowywać bezpośrednio przed użyciem.
• Nieprzetworzonego nasienia nie wolno nigdy wirować.
• Odczekać, aż nasienie przybierze postać płynną w temperaturze 37 °C przez 30 minut.
• Ogrzewać Spermient do temperatury 37 °C przez co najmniej 4 godziny przed użyciem.
• Przygotować dwa gradienty poprzez dodanie 1,5 mL lub 40% na podkładzie z 1,5 mL 80% w
probówkach ze stożkowym dnem.
• Załadować 60% lub do 2,0 mL produktu wytrysku na jeden gradient i 40% lub do 1,2 mL na
drugi.
• Odwirować przez 20 minut przy 300 G, po czym ostrożnie usunąć osocze nasienia, górną
powierzchnię styku, 40% warstwę i dolną powierzchnię styku. Pozostawić pozostałą część
80% nienaruszoną.
• Odzyskać grudkę spermy za pomocą czystej pipety Pasteura i ponownie umieścić w 3 mL
buforu do gamet (K-SIGB).
• Odwirować przez 10 minut przy 600 G.
• Powtórzyć czynność przepłukiwania w następnych 3 mL buforu do gamet (K-SIGB).
• Usunąć sklarowaną ciecz nad osadem i ponownie umieścić grudkę w niewielkiej ilości (około
200 μL) podłoża dla nasienia (K-SISM) lub podłoża do zapłodnienia (K-SIFM).
• Ustalić liczbę plemników i obliczyć stężenie. Dostosować według potrzeby.
• Przechować w inkubatorze w warunkach 6% CO
wykorzystania.
PODŁOŻE DLA NASIENIA SYDNEY IVF K SISM 20, K SISM 50 I
K SISM 100
PRZEZNACZENIE
Podłoże do nasienia jest przeznaczone do stosowania podczas zabiegów zapłodnienia in vitro
w celu przygotowania nasienia.
, w temperaturze 37 °C do chwili
2
119