COOK Medical IVF Media Instructions For Use Manual page 15

SPERMIENT SYDNEY IVF K SISP 20 И K SISP 100
ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ
Spermient се използва за отделяне на сперма въз основа на плътността с помощта на
разтвори за плътностен градиент.
ОБЩА ИНФОРМАЦИЯ
Spermient е с добавени човешки серумен албумин (10 mg/mL) и гентамицин (0,01 mg/mL).
Готов за употреба след уравновесяване до 37 °C.
СЪХРАНЯВАНЕ И СТАБИЛНОСТ
Spermient трябва да се съхранява в оригиналната неотворена опаковка, в хладилник на
2-8 °C. Да не се замразява.
УКАЗАНИЯ ЗА УПОТРЕБА
• Използвайте асептична техника.
• Спермата трябва да се обработи до един час от събирането.
• Spermient трябва да бъде разреден с гаметен буфер (K-SIGB) до подходяща
концентрация за подготовка на спермата (напр. градиенти 40% и 80%).
• Градиентите трябва да бъдат приготвени непосредствено преди употреба.
• Необработената сперма никога не трябва да се центрофугира.
• Оставете спермата да се втечни на 37 °C за 30 минути.
• Преди употреба затоплете Spermient до 37 °C за най-малко 4 часа.
• Пригответе два градиента чрез добавяне на 1,5 mL 40% върху 1,5 mL 80% в епруветки с
конично дъно.
• Заредете 60% или до 2,0 mL от еякулата върху единия градиент и 40% или до 1,2 mL
върху другия.
• Центрофугирайте 20 минути при 300 G и след това внимателно отстранете спермената
плазма, горната фазова граница, 40%-я слой и долната фазова граница. Оставете
остатъка от 80% непокътнат.
• Извлечете утайката от спермата с помощта на чиста Пастьорова пипета и
суспендирайте повторно в 3 mL гаметен буфер (K-SIGB).
• Центрофугирайте за 10 минути при 600 G.
• Повторете стъпката на промиване в още 3 mL гаметен буфер (K-SIGB).
• Отстранете супернатанта и суспендирайте повторно утайката в малък обем
(приблизително 200 µL) лабораторна среда за сперма (K-SISM) или лабораторна среда за
оплождане (K-SIFM).
• Пребройте сперматозоидите и изчислете концентрацията. Коригирайте според
нуждите.
• Съхранявайте в инкубатор с контрол за 6% CO
ЛАБОРАТОРНА СРЕДА ЗА СПЕРМА SYDNEY IVF K SISM 20,
K SISM 50 И K SISM 100
ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ
Лабораторната среда за сперма е предназначена за употреба по време на процедури за in
vitro оплождане за обработване на сперма.
на 37 °C колкото е необходимо.
2
15