COOK Medical IVF Media Instructions For Use Manual page 99

SPERMIENT SYDNEY IVF K SISP 20 E K SISP 100
USO PREVISTO
Il prodotto Spermient serve per separare lo sperma in base alla sua densità, utilizzando le
soluzioni a gradiente di densità.
INFORMAZIONI GENERALI
Lo Spermient è addizionato di albumina sierica umana (10 mg/mL) e gentamicina (0,01 mg/mL).
Pronto per l'uso dopo stabilizzazione a 37 °C.
CONSERVAZIONE E STABILITÀ
Lo Spermient deve essere conservato in frigorifero a 2-8 °C nel suo contenitore originale
sigillato. Non congelare.
MODALITÀ D'IMPIEGO
• Adottare una tecnica asettica.
• Trattare lo sperma entro un'ora dalla raccolta.
• Lo Spermient deve essere diluito con buffer per gameti (K-SIGB) a una concentrazione idonea
per la preparazione dello sperma (es. gradienti del 40% e 80%).
• Preparare i gradienti immediatamente prima dell'uso.
• Lo sperma grezzo non deve mai essere centrifugato.
• Lasciar liquefare lo sperma a 37 °C per 30 minuti.
• Riscaldare lo Spermient a 37 °C per almeno 4 ore prima dell'uso.
• In provette con fondo conico preparare due gradienti aggiungendo 1,5 mL di 40% e come
sottostrato 1,5 mL di 80%.
• Caricare il 60% o fino a 2,0 mL dell'eiaculato su un gradiente e il 40% o fino a 1,2 mL sull'altro
gradiente.
• Centrifugare per 20 minuti a 300 G, quindi rimuovere con cautela il plasma seminale,
l'interfaccia superiore, lo strato di 40% e l'interfaccia inferiore. Lasciare il resto dell'80% intatto.
• Recuperare il pellet di sperma utilizzando una pipetta Pasteur pulita e risospendere in 3 mL
di buffer per gameti (K-SIGB).
• Centrifugare per 10 minuti a 600 G.
• Ripetere la fase di lavaggio con altri 3 mL di buffer per gameti (K-SIGB).
• Rimuovere il supernatante e risospendere il pellet in un piccolo volume (circa 200 μL) di
mezzo per sperma (K-SISM) o mezzo di fecondazione (K-SIFM).
• Contare gli spermatozoi e calcolarne la concentrazione. Regolare come necessario.
• Conservare in un'incubatrice a 6% di CO
MEZZO PER SPERMA SYDNEY IVF K SISM 20, K SISM 50 E
K SISM 100
USO PREVISTO
Il mezzo per sperma è previsto per l'uso durante le procedure di fecondazione in vitro per il
trattamento dello sperma.
INFORMAZIONI GENERALI
Il mezzo per sperma è addizionato di albumina sierica umana (10 mg/mL) e gentamicina
(0,01 mg/mL).
Pronto per l'uso dopo stabilizzazione a 37 °C e al 6% di CO
a 37 °C fino al momento dell'uso.
2
.
2
99