COOK Medical IVF Media Instructions For Use Manual page 78

SYDNEY IVF SPERMIENT K SISP 20 JA K SISP 100
KÄYTTÖTARKOITUS
Spermientiin avulla sperma erotetaan tiheyden perusteella tiheysgradienttimenetelmällä.
YLEISTÄ
Spermienttiin on lisätty ihmisen seerumin albumiinia (10 mg/mL) ja gentamisiinia (0,01 mg/mL).
Valmis käytettäväksi 37 °C:n lämpötilaan tasapainotuksen jälkeen.
SÄILYTYS JA STABIILIUS
Spermient on säilytettävä alkuperäisessä avaamattomassa astiassa jääkaapissa 2–8 °C:n
lämpötilassa. Ei saa jäätyä.
KÄYTTÖOHJEET
• Aseptista tekniikkaa tulee käyttää.
• Siemenneste tulee prosessoida tunnin kuluessa keruusta.
• Spermient pitää laimentaa sukusolupuskurilla (K-SIGB) sopivaan konsentraatioon sperman
valmistelua varten (esim. 40 %:n ja 80 %:n gradientit).
• Gradientit tulee valmistaa välittömästi ennen käyttöä.
• Käsittelemätöntä siemennestettä ei saa sentrifugoida milloinkaan.
• Anna siemennesteen nesteytyä 37 °C:n lämpötilassa 30 minuutin ajan.
• Lämmitä Spermient 37-asteiseksi vähintään 4 tuntia ennen käyttöä.
• Valmista kaksi gradienttia lisäämällä 1,5 mL 40 %:n kerrosta 1,5 mL:aan 80 %:n kerrokseen
kartiopohjaisissa koeputkissa.
• Lataa 60 % tai enintään 2,0 mL ejakulaattia yhteen gradienttiin ja 40 % tai enintään 1,2 mL
toiseen.
• Sentrifugoi 20 minuuttia 300 G:llä, ja poista sitten varovasti siemennesteen plasma, ylempi
faasi, 40 %:n kerros ja alempi faasi. Jätä loput 80 % koskemattomaksi.
• Ota talteen spermapelletti käyttäen puhdasta Pasteur-pipettiä ja suspendoi uudelleen
3 mL:ssa sukusolupuskuria (K-SIGB).
• Sentrifugoi 10 minuutin ajan 600 G:llä.
• Toista pesuvaihe vielä 3 mL:ssa sukusolupuskuria (K-SIGB).
• Poista supernatantti ja suspendoi pelletti uudelleen pienessä määrässä (noin 200 µL)
spermaliuosta (K-SISM) tai hedelmöitysliuosta (K-SIFM).
• Määritä sperma ja laske konsentraatio. Säädä tarpeen mukaan.
• Säilytä spermaa 6 %:n CO
SYDNEY IVF SPERMALIUOS K SISM 20, K SISM 50 JA K SISM 100
KÄYTTÖTARKOITUS
Spermaliuos on tarkoitettu käytettäväksi koeputkihedelmöitystoimenpiteiden aikana sperman
käsittelyä varten.
YLEISTÄ
Spermaliuokseen on lisätty ihmisen seerumin albumiinia (10 mg/mL) ja gentamisiinia
(0,01 mg/mL).
Valmis käytettäväksi 37-asteiseksi lämmittämisen ja 6 % CO
-inkubaattorissa 37 °C:n lämpötilassa siihen asti, kunnes sitä tarvitaan.
2
78
-tasapainotuksen jälkeen.
2