COOK Medical IVF Media Instructions For Use Manual page 160

SPERMIENT SYDNEY IVF K SISP 20 A K SISP 100
URČENÉ POUŽITIE
Spermient sa používa na separáciu spermií na základe hustoty pomocou roztokov gradientu
hustoty.
VŠEOBECNÉ INFORMÁCIE
Súčasťou prípravku Spermient je albumín z ľudského séra (10 mg/mL) a gentamicín
(0,01 mg/mL).
Pripravené na použitie po dosiahnutí teploty 37 °C.
SKLADOVANIE A STABILITA
Prípravok Spermient je potrebné skladovať v pôvodnej neotvorenej nádobe v chladničke pri
teplote 2 – 8 °C. Nezmrazujte.
NÁVOD NA POUŽITIE
• Použite aseptický postup.
• Semeno je potrebné spracovať do jednej hodiny od odberu.
• Spermient sa musí zriediť s roztokom na zárodočné bunky (K-SIGB) na koncentráciu vhodnú
na prípravu spermií (napr. 40 % a 80 % gradienty).
• Gradienty je potrebné pripraviť bezprostredne pred použitím.
• Nespracované semeno sa nikdy nesmie odstreďovať.
• Semeno nechajte skvapalniť pri teplote 37 °C po dobu 30 minút.
• Pred použitím zahrievajte prípravok Spermient na teplotu 37 °C po dobu min. 4 hodín.
• Do skúmaviek s kónickým dnom si pripravte dva gradienty pridaním 1,5 mL s koncentráciou
40 % a spodnej vrstvy s objemom 1,5 mL a koncentráciou 80 %.
• Preneste 60 % (alebo max. 2,0 mL) ejakulátu do jedného gradientu a 40 % (alebo max. 1,2 mL)
do druhého gradientu.
• Odstreďujte po dobu 20 minút pri rýchlosti 300 G a potom opatrne odstráňte semennú
plazmu, vrchnú časť, 40 % vrstvu a spodnú časť. Zvyšných 80 % objemu ponechajte
neporušených.
• Odoberte spermatickú peletu pomocou čistej Pasteurovej pipety a resuspendujte ju v 3 mL
roztoku na zárodočné bunky (K-SIGB).
• Odstreďujte po dobu 10 minút s rýchlosťou 600 G.
• Opakujte krok opláchnutia pomocou ďalších 3 mL roztoku na zárodočné bunky (K-SIGB).
• Odstráňte supernatant a resuspendujte peletu v malom objeme (približne 200 μL)
spermatického média (K-SISM) alebo fertilizačného média (K-SIFM).
• Spočítajte spermie a vypočítajte koncentráciu. Podľa potreby vykonajte požadované úpravy.
• Skladujte v inkubátore s obsahom 6 % CO
SPERMATICKÉ MÉDIUM SYDNEY IVF K SISM 20, K SISM 50 A
K SISM 100
URČENÉ POUŽITIE
Spermatické médium je určené na použitie počas zákrokov in vitro fertilizácie na
spracovanie semena.
pri teplote 37 °C až do upotrebenia.
2
160