COOK Medical IVF Media Instructions For Use Manual page 35

• Gametebuffer er egnet til både åben kultur og mikrokultur. Hvis der anvendes mikrodråber,
skal man sørge for at anvende kulturolie (K-SICO) for at undgå fordampning.
• Opvarm gametebufferen til 37 °C inden brug.
SYDNEY IVF SÆDGRADIENT K SISG 20 OG K SISG 50
TILSIGTET ANVENDELSE
Sædgradientsæt anvendes til at separere sæd på grundlag af tæthed ved hjælp af
tæthedsgradientopløsninger.
GENEREL INFORMATION
Opløsningerne er tilsat humant serum albumin (10 mg/mL) og gentamicin (0,01 mg/mL).
Klar til brug efter ækvilibrering til 37 °C.
OPBEVARING OG STABILITET
Sædgradientsæt skal opbevares i den originale uåbnede beholder, nedkølet ved 2-8 °C. Må
ikke fryses.
VEJLEDNING
• Der skal anvendes aseptisk teknik.
• Sæden skal behandles inden for en time efter indsamling.
• Gradienter skal klargøres umiddelbart inden brug.
• Råsæd må ikke centrifugeres på noget tidspunkt.
• Lad sæden blive flydende ved 37 °C i 30 minutter.
• Opvarm sædgradientsættet til 37 °C i mindst fire timer inden brug.
• Klargør to gradienter ved at sætte 1,5 mL på 40 % underlagt med 1,5 mL på 80 % til
reagensglas med konisk bund.
• Sæt 60 % eller op til 2,0 mL af ejakulatet på den ene gradient og 40 % eller op til 1,2 mL på
den anden.
• Centrifugér i 20 minutter ved 300 G, hvorefter sædplasmaen, den øverste kontaktflade,
40 %-laget og den nederste kontaktflade forsigtigt fjernes. Lad resten af de 80 % være intakt.
• Sædpelleten opsamles ved hjælp af en ren dråbepipette og resuspenderes i 3 mL
gametebuffer (K-SIGB).
• Centrifugeres i 10 minutter ved 600 G.
• Gentag vasketrinnet i endnu en 3 mL gametebuffer (K-SIGB).
• Fjern supernatanten og resuspender pelleten i en lille mængde (ca. 200 µL) sædmedie
(K-SISM) eller fertilisationsmedie (K-SIFM).
• Tæl sæden og beregn koncentrationen. Justér efter behov.
• Opbevares i en 6 % CO inkubator ved 37 °C indtil anvendelse.
2
SYDNEY IVF SPERMIENT K SISP 20 OG K SISP 100
TILSIGTET ANVENDELSE
Spermient anvendes til at separere sæd på grundlag af tæthed ved hjælp af
tæthedsgradientopløsninger.
GENEREL INFORMATION
Spermient er tilsat humant serum albumin (10 mg/mL) og gentamicin (0,01 mg/mL).
Klar til brug efter ækvilibrering til 37 °C.
35