COOK Medical IVF Media Instructions For Use Manual page 135

INFORMAÇÕES GERAIS
O kit de aquecimento de blastocistos é constituído por três meios tamponados HEPES
concebidos para uso sequencial. As soluções de aquecimento são suplementadas com
albumina sérica humana (até 20,0 mg/mL) e gentamicina (0,01 mg/mL).
DESCRIÇÃO DO PRODUTO
Os três meios baseiam-se na formulação do tampão Cryobase, um meio tamponado HEPES
de 10 mM contendo 20,0 mg/mL de albumina sérica humana e 0,01 mg/mL de gentamicina.
A solução 1 é o primeiro meio utilizado no processo de descongelação e contém tampão
Cryobase com 0,33 M de trealose. A solução 2 contém o tampão Cryobase com 0,2 M de
trealose. A solução 3 é utilizada para a recuperação e contém apenas o tampão Cryobase.
CONSERVAÇÃO E ESTABILIDADE
O kit de aquecimento de blastocistos tem de ser conservado no recipiente original fechado,
refrigerado a 2-8 °C.
INSTRUÇÕES DE UTILIZAÇÃO
Preparação
• Utilizar técnica asséptica.
• Equilibre as três soluções de aquecimento até 37 °C antes de utilizar.
• Prepare um volume adequado do meio de blastocistos (K-SIBM) numa incubadora com um
ambiente de CO a 6% a 37 °C antes da utilização, para a cultura do blastocisto pós-
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aquecimento.
Método
• Identifique o(s) dispositivo(s) de vitrificação a ser(em) aquecido(s) e aqueça de acordo com as
instruções do fabricante.
• Prepare as soluções de aquecimento numa placa de 4 poços através da adição de 800 μL da
solução de aquecimento 1 no poço 1 e 2, 800 μL da solução de aquecimento 2 no poço 3 e
800 μL da solução de aquecimento 3 no poço 4.
• Extraia de imediato o embrião do dispositivo de vitrificação, coloque-o no poço 1 e AGITE DE
IMEDIATO até à dissolução da conta.
• Com uma pipeta, transfira o embrião para o poço 2 durante 5 minutos.
• Mova para o poço 3 durante 5 minutos. Lave o poço do embrião.
• Mova para o poço 4 durante 5 minutos. Lave o poço do embrião.
• Coloque o embrião na placa que contém o meio de blastocistos (K-SIBM) equilibrado
preparado para incubação.
• Se necessário, incube o embrião (método a laser preferencial) e mova-o para uma nova
micro-gotícula de meio de blastocistos (K-SIBM) equilibrado.
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