3M Petrifilm 6447 Product Instructions page 34

2. Tillsätt aseptiskt 5 mL sterilt (20–30 °C) buffrat peptonvatten
insamlade provet.
3. Blanda, homogenisera eller vortexblanda det insamlade provet (steg 1) med den återställande buljongen i cirka en
minut.
4. Låt det insamlade provet vila i rumstemperatur, 20–30 °C, under 1 till 1,5 timma.
5. För optimal tillväxt och återfinnande av bakterier ska provet ha ett pH-värde mellan 4 och 9.
Applicering på platta
1. Placera 3M Petrifilm EL Plate på en plan och jämn yta.
2. Innan provet appliceras på plattan ska det blandas eller vortexblandas på nytt.
3. Sug upp 3 mL vätska från det insamlade provet. När vissa insamlingsenheter används, såsom svampar, ska du krama
om enheten för att frigöra vätska för appliceringen på plattan.
4. Lyft den övre filmen och fördela 3 mL av provsuspensionen med lodrät pipett över mitten av den undre filmen.
5. Använd en rullande rörelse vid placering av den övre filmen på provet för att förhindra att luftbubblor bildas.
6. För försiktigt 3M™ Petrifilm™ stor fyrkantig spridarplatta över mitten av 3M Petrifilm EL Plate för att sprida provet
jämnt över hela tillväxtytan på 3M Petrifilm EL Plate.
7. Avlägsna spridaren och låt 3M Petrifilm EL Plate ligga orörd i minst en minut tills det bildas gel.
Inkubering
Inkubera 3M Petrifilm EL Plates i horisontellt läge, med den genomskinliga sidan uppåt, i staplar om högst 10 plattor.
Inkubera 3M Petrifilm EL Plates i 28 timmar ± 2 timmar vid 35 °C ± 1 °C eller 37 °C ± 1 °C. Flera inkuberingstider och
-temperaturer kan användas beroende på gällande lokala referensmetoder, av vilka några anges i avsnittet "Specifika
anvisningar för validerade metoder". Inkubering utöver den rekommenderade tiden kan ge tvetydiga resultat.
Tolkning
1. 3M Petrifilm EL Plates kan avläsas eller tolkas med en vanlig koloniräknare eller annat förstoringsglas med ljuskälla.
2. Den runda tillväxtytan är cirka 42 cm
3. 3M Petrifilm EL Plate kan användas för kvantitativa, semikvantitativa och kvalitativa test.
a. Vid kvantitativa test, räkna och dokumentera alla rödvioletta kolonier. Räkna ej kolonier utanför odlingsytan då
dessa ej har utsatts för mediets selektiva inverkan.
b. Vid semikvantitativa test, dokumentera resultatet som högt, medelhögt eller lågt utifrån det relativa antalet
rödvioletta kolonier i provet. Beteckningen högt, medelhögt eller lågt beror på provplatsen och den enskilda
anläggningens standarder.
c. Vid kvalitativa test, dokumentera provresultatet som positivt (detekterat) eller negativt (inte detekterat) utifrån
närvaron eller frånvaron av rödvioletta kolonier.
4. Om 3M Petrifilm EL Plates har inkuberats under minimal tid och de uppvisar rosa och/eller grå kolonier ska dessa
plattor inkuberas på nytt upp till maximal inkuberingstid för att säkerställa optimal färgutveckling. Räkna och tolka
som i steg 3.
5. Om det finns ett stort antal kolonier kan 3M Petrifilm EL Plates uppvisa små, otydliga kolonier och/eller en
genomgående rosa-brun färg.
a. Vid kvantitativa test ska resultatet dokumenteras som "alltför talrika att räkna" (TNTC - Too Numerous To
Count).
b. Vid semikvantitativa test ska resultatet dokumenteras som högt.
c. Vid kvalitativa test ska resultatet dokumenteras som positivt (detekterat).
6. Vid behov kan kolonier isoleras för ytterligare identifiering. Lyft den övre filmen och plocka bort kolonin från gelen.
Testa enligt standardförfarande.
7. Om det inte går att räkna 3M Petrifilm EL Plates inom 1 timme efter att de tagits ut ur inkubatorn, kan de förvaras för
senare räkning genom att frysa dem i en förslutningsbar behållare vid temperaturer som är lägre än eller lika med
-15 ºC under högst en vecka. Organismerna är eventuellt inte livskraftiga nog för ytterligare identifiering efter att
plattorna har frysts ned.
4,5
.
2
3
SV
(används som återställande buljong) till det
(Svenska)