Allgemeine Bedienungshinweise; Vorbereitung Des Systems Und Gießen Des Agarosegels - VWR Peqlab PerfectBlue Mini S Instruction Manual

Bedienungsanleitung PerfectBlue

ALLGEMEINE BEDIENUNGSHINWEISE

Vorbereitung des Systems und Gießen des Agarosegels
1. Entfernen Sie den Sicherheitsdeckel von der Gelkammer durch Festhalten der Pufferkammer mit der
einen Hand und Ziehen an der Rückseite des Deckels mit der anderen Hand.
2. Der Gelträger ist für den Versand bereits in die Gelkammer eingesetzt und zwar in der 90 °-
Position, welche auch beim Gießen der Gele Verwendung findet. Um den Gelträger aus der Kam-
mer herauszunehmen, halten Sie die Pufferkammer mit einer Hand fest und ziehen den Gelträger
langsam nach oben heraus. Abwechselndes Anheben der Seiten des Gelträgers unterstützt die Ent-
nahme des Gelträgers. Bitte achten Sie darauf, den Gelträger dabei nur um seine Längsachse, nicht
aber um seine Querachse zu verkanten. Letzteres kann aufgrund der mechanischen Beanspruchung
auf Dauer zu Rissen an den Rinnen an den beiden Enden des Gelträgers führen.
3. Falls Sie den Gelträger aus der Pufferkammer entnommen oder in Laufrichtung gedreht hatten, set-
zen Sie ihn zum Gießen des Gels bitte um 90 ° von der Laufrichtung gedreht in die Gelkammer ein.
Auf diese Weise werden die beiden offenen Enden des Gelträgers über die Gummidichtungen von
den Gelkammerwänden abgedichtet. Wichtig ist, dass der Gelträger ganz nach unten gedrückt ist
und gerade in der Kammer sitzt. In ähnlicher Weise können die Gelträger auch in externen Gieß-
schienen abgedichtet werden. Ein vorheriges Anfeuchten der Gummidichtungen des Gelträgers er-
leichtert dessen Einsetzen in die Kammer. Bei der Verwendung der justierbaren Gießschiene
JustCast kann auf die beiden Gummidichtungen des Gelträgers verzichtet werden.
Optional: Mit dem für die Mini L und Mini L 'Revolution' erhältlichen Trennkamm kann der Gelträger
unterteilt werden, um kürzere Gele zu gießen. Da der Trennkamm keine Gummidichtungen enthält,
sollte er mit 2 %iger Agaroselösung abgedichtet werden, bevor das eigentliche Gel gegossen wird.
4. Für Gele sollten nur für Elektrophorese taugliche Agarosen und entsprechende Puffer benutzt wer-
den. Das Gel kann auf verschiedene Arten angesetzt werden. Agaroseart und -Konzentration sowie
der verwendete Puffer sind abhängig von Art und Länge der aufzutrennenden Nukleinsäuren sowie
den geplanten Folgeanwendungen (siehe 'BENÖTIGTE MATERIALIEN & REZEPTE'). Die entspre-
chende Menge Agarose wird in den Puffer gegeben, gemischt und über einer Heizplatte unter Rüh-
ren erhitzt bzw. in der Mikrowelle aufgekocht, bis die Agarose komplett aufgelöst ist.
5. Um eine Verformung der Gelträger aufgrund zu hoher Temperaturen zu vermeiden, sollte die Gellö-
sung auf 60 °C abgekühlt sein, bevor sie in den Gelträger gegossen wird. Werden an einem Tag
zahlreiche Gele benötigt, kann eine größere Menge Gellösung angesetzt und in einem bedeckten
Gefäß bei 60 °C im Wasserbad oder Wärmeschrank bis zur weiteren Verwendung aufbewahrt
werden.
6. Unmittelbar nachdem eine entsprechende Menge (siehe 'Agarose: Gelvolumen und -Konzentration')
der Agaroselösung möglichst luftblasenfrei in den Gelträger gegossen wurde, sollten der oder die
Kämme eingesetzt werden. Gele aus handelsüblicher Standard-Agarose verfestigen sich bei Raum-
temperatur innerhalb von ca. 30 Minuten. Sollten Sie 'Low-Melting'- oder andere Spezialagarosen
verwenden, befolgen Sie bitte die jeweiligen Herstellerangaben.
VWR_v0617_D
Horizontale Minigelsysteme
TM
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