Allgemeine Bedienungshinweise; Vorbereitung Des Systems Und Gießen Des Agarosegels - VWR PerfectBlue Maxi S Instruction Manual

Bedienungsanleitung PerfectBlue

ALLGEMEINE BEDIENUNGSHINWEISE

Vorbereitung des Systems und Gießen des Agarosegels
1. Entfernen Sie den Sicherheitsdeckel von der Gelkammer durch Festhalten der Pufferkammer mit der
einen Hand und Ziehen an der Rückseite des Deckels mit der anderen Hand.
2. Dichten Sie die offenen Enden des Gelträgers durch Einschieben der beiden 'End Gates' in die dafür
vorgesehenen Ausfräsungen des Gelträgers ab. Dabei sollten die Gummidichtungen der 'End Gates'
zu der vom Gel abgewandten Seite (nach außen) gerichtet sein. Setzen Sie nun den abgedichteten
Gelträger in die Pufferkammer ein und nivellieren Sie das System mit Hilfe des integrierten Drei-
Punkt-Nivellierungssystems und der Wasserwaage.
Optional: Mit einem als Zubehör erhältlichen Trennkamm kann der Gelträger unterteilt werden, um
kürzere Gele zu gießen. Da der Trennkamm keine Gummidichtungen enthält, sollte er mit 2 %iger
Agaroselösung abgedichtet werden, bevor das eigentliche Gel gegossen wird.
Alternativ kann hierfür ein als Zubehör erhältlicher Gießdamm verwendet werden. Diese Alumini-
um-Schiene kann an einer beliebigen Position in den Gelträger eingesetzt werden. Aufgrund der
optimalen Passfähigkeit und der Wärmeleitfähigkeit des Materials ist zum Abdichten mit dem
Gießdamm weder Klebeband noch konzentrierte Agarose erforderlich.
3. Für Gele sollten nur für Elektrophorese taugliche Agarosen und entsprechende Puffer benutzt wer-
den. Das Gel kann auf verschiedene Arten angesetzt werden. Agaroseart und -Konzentration sowie
der verwendete Puffer sind abhängig von Art und Länge der aufzutrennenden Nukleinsäuren sowie
den geplanten Folgeanwendungen (siehe 'BENÖTIGTE MATERIALIEN & REZEPTE'). Die entspre-
chende Menge Agarose wird in den Puffer gegeben, gemischt und über einer Heizplatte unter Rüh-
ren erhitzt bzw. in der Mikrowelle aufgekocht, bis die Agarose komplett aufgelöst ist.
4. Um eine Verformung der Gelträger aufgrund zu hoher Temperaturen zu vermeiden, sollte die Gellö-
sung auf 60 °C abgekühlt sein, bevor sie in den Gelträger gegossen wird. Werden an einem Tag
zahlreiche Gele benötigt, kann eine größere Menge Gellösung angesetzt und in einem bedeckten
Gefäß bei 60 °C im Wasserbad oder Wärmeschrank bis zur weiteren Verwendung aufbewahrt
werden.
5. Unmittelbar nachdem eine entsprechende Menge (siehe 'Agarose: Gelvolumen und -Konzentration')
der Agaroselösung möglichst luftblasenfrei in den Gelträger gegossen wurde, sollten der oder die
Kämme eingesetzt werden. Gele aus handelsüblicher Standard-Agarose verfestigen sich bei Raum-
temperatur innerhalb von ca. 30 Minuten. Sollten Sie 'Low-Melting'- oder andere Spezialagarosen
verwenden, befolgen Sie bitte die jeweiligen Herstellerangaben.
VWR_v0617_D
Horizontale Maxigelsysteme
TM
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