Advertisement
Available languages
Available languages
Quick Links
Advertisement
Related Manuals for Agilent Technologies GPC/SEC
Summary of Contents for Agilent Technologies GPC/SEC
- Page 1 GPC/SEC Column User Guide カラムユーザーガイド 色谱柱用户指南 Manual do usuário de colunas...
-
Page 2: Installation
0.210 in is required. Some fittings from other manufacturers may not be compatible, for example Waters and Rheodyne. If unsure, please contact Agilent Technologies. Column connection Connect the GPC column in the eluent flow direction indicated and tighten the 1/16 in nut and ferrule using wrenches on the 1/16 in nut and the actual end fitting. - Page 3 English Eluent Flow Rate For conventional GPC columns using 7.5 and 7.8 mm id columns, 1.0 mL/min is an optimum flow rate for most separations. When column id is increased or decreased, the volumetric flow rate should be adjusted accordingly in order to give an equivalent linear velocity through the column.
- Page 4 English Eluents All eluents should be of high purity and should be filtered and degassed prior to use. GPC columns can be transferred to other eluents. When transferring to another eluent, miscibility and viscosity of the new eluent are of primary consideration.
- Page 5 English Organic columns (PLgel; PlusPore; PL Rapide) Column supplied in ethylbenzene Transfer to Transfer Transfer to low viscosity to medium high viscosity solvents e.g. viscosity solvents e.g. solvents e.g. THF, Chloroform, TCB, m-Cresol, Toluene, DMF, Dichloromethane DMSO, HFIP Flush column Flush column Set column oven with acetone at...
- Page 6 Band broadening effects are more severe when using high efficiency and/ or narrow bore GPC/SEC columns. It is vital to ensure that the system dispersion is minimized in order to obtain the full potential of Agilent columns.
- Page 7 For columns used at or above 170 °C, the warranty period is reduced to 30 days. Agilent Technologies cannot accept liability from improper handling and use of columns above their maximum operation temperature and pressure (see Table 3) and void the warranty.
- Page 8 Agilent recommends that preparative columns are returned to Agilent for fitment of replacement frits or repair, however, a similar procedure to the above can be applied if necessary. For further technical assistance, or to use the Column Repair Service, please contact Agilent Technologies.
- Page 9 日本語版 取り付け チューブとコネクタ 分析カラムのカラム接続には外径 1/16 インチ、 内径 0.12 mm または 0.17 mm のステンレスス チールチューブを、25 mm 分取カラムには内径 0.5 mm のステンレススチールチューブを推奨 します。システムパフォーマンスの低下を招く デッドボリュームの増加を防ぐには、カラム、 検出器、インジェクター間の接続チューブの長 さをできるだけ短くする必要があります。カラ ム接続には、Parker 互換 1/16 インチナットと フェラルを使用します。図１に、カラムコネク タの互換性を示します。 図１. 互換コネクタ 標準カラムエンドフィッティングの距離 “X” は 0.090 インチであるため、長さ 0.210 インチ以上 のオスナットが必要です。Waters、Rheodyne など、他の製造元の一部のフィッティングは、 使用できない可能性があります。ご不明の場合...
- Page 10 日本語版 溶離液の流速 内径 7.5 mm または 7.8 mm のカラムを使用す る従来の GPC カラムの場合、流速 1.0 mL/min がほとんどの分離に適しています。カラムの内 径がそれより大きいか、小さいときには、カラ ムを通過する際に同等の線速度が得られるよう に、内径に合わせて流量を調整する必要があり ます。 表 1 に、推奨流速を示します。ただし、圧力が 過剰に高くなるのを防ぐために、粘度の高い溶 離液を使用する場合は、流速を遅くするか、昇 温してください。流速を徐々に変化させ、脈流 を抑えます。カラムの最大稼働圧を超えてはな りません ( 表４を参照してください )。 表１. 推奨流速 代表流速 カラム 推奨流速（mL/min） （mL/min） 内径 2.1 mm 0.04 ～ 0.1 0.06 内径...
- Page 11 日本語版 粘 性 の 高 い 溶 離 液 ( た と え ば、TCB、NMP、 DMF) 中でカラムを加熱または冷却する際には、 低い溶媒の流速を常に保持する必要がありま す。通常、昇温前は、内径 7.5 mm には 0.2 mL/ min 、内径 4.6 mm には 0.1 mL/min を使用しま す ( 図 3 を参照してください )。 有機溶媒系 有機溶媒系 GPC カラムは、極性がパーフルオロ アルカンからジメチルホルムアミドまでの広い...
- Page 12 日本語版 有機溶媒系カラム (PLgel、PlusPore、PL Rapide) カラムはエチルベンゼン中に保存された状態で提供されます 低粘性溶媒への置 中粘性溶媒への置 高粘性溶媒への置 き換え例 き換え例 き換え例 トルエン クロロホルムジク m- クレゾール ロロメタン DMSO, HFIP カラムをアセトン カラムをアセトン カラムオーブンを で、0.5 mL/min で、0.5 mL/min 50 ℃、流量を 0.1 で 2 カラム容量分 で 2 カラム容量分 mL/min に設定 フラッシュ フラッシュ 新しい溶離液で、 新しい溶離液で、 カラムを新しい溶...
- Page 13 さにおけるピーク幅、“W5 σ” はピーク高さの 4.4% におけるピーク幅、 “L” はカラム長さ ( メー トル単位 )、“a” と “b” はピーク高さの 10% で測 定される垂線の両側のピーク幅です。 カラム効率は、多数の実験的要因 ( システムの デッドボリューム、溶離液、流速、テスト試薬、 温度など ) に依存します。これらのパラメータ の変動性により、テスト結果は、カラム証明書 に記載されたものと異なる可能性があります。 バンドの広がりの影響は、高速高分離またはナ ローボア GPC/SEC カラムを使用する場合によ り重大です。Agilent カラムの潜在能力を最大限 に引き出すには、システムにおける拡散を最小 限に抑えることが重要です。 パフォーマンスは、カラムセットの初回使用時 に測定後、定期的に測定することを推奨します。 カラムの効率が初期値の 80% 未満になったら、 カラムの交換を検討してください。...
- Page 14 日本語版 表 3. カラム仕様 カラム 代表動作 最大動作圧 最大使用 圧力 psi 力 psi (bar) 温度℃ (bar) PLgel 3 µm 750 (50) 2,700 (180) PLgel 5 µm 450 (30) 2,200 (150) PLgel 9 & 10 µm 150 (10) 2,200 (150) PLgel 20 µm 50 (3) 2,200 (150) PLgel Olexis...
- Page 15 日本語版 保管 システムからカラムを取り外したらすぐに、蒸 発によるカラムの乾燥を防ぐため、エンドプラ グを元の位置に戻します。戻さないと、ゲルの 収縮や充填剤の崩壊が発生することがありま す。エンドプラグは、指で締めます。これまで に説明した溶離液はすべて、保管に適していま すが、安定化されていない THF とハロゲン化溶 剤は使用しないでください。 水系カラムを長期間保管する場合、水でフラッ シュし、0.02% アジ化ナトリウム水溶液で保管 します。 保証 カラムには、出荷日から 90 日間の保証が付い ています。カラムを 170 ℃以上で使用する場合、 保証期間は 30 日に短縮されます。アジレント・ テクノロジーは、不適切な処理および最大使用 温度と圧力 ( 表 3 を参照 ) を超えたカラムの使 用の結果生じた損害に対して責任を負わないも のとし、保証は無効となります。保証の全文に ついては、アジレントの一般販売条件をご請求 ください。 メンテナンス 充填ベッドの損傷や、カラムフリットの目詰ま りの結果、カラムパフォーマンスが低下する可...
- Page 16 日本語版 フリット交換手順 1. カラムの出口端のエンドフィッティングを 密封します。注入口端の最上部でカラムをクラ ンプで垂直に固定します。カラムの注入口端の エンドフィッティングをゆるめて、静かに取り 外します ( 水系カラムの場合、この手順の前に、 フラッシュにより溶離液を水に置き換えます )。 2. エンドフィッティングからゲルを除去した 後、フリット、シール、スプレッダをフリット 除去ツールで取り外し、エンドフィッティング からゲルのすべての痕跡を洗い流します。次に 新しいフリット、シール、スプレッダをエンド フィッティングの底に置き、正しく装着されて いることを確認します。 3. 一部のゲル (2 mm まで ) がカラムからはみ出 している可能性があります。スパチュラを使用 して、カラムの一番上にリペアゲルをドーム形 にのせ、充分な量の溶媒を加えて、ゲル粒子同 士を結合させます。 4. カラムを 45 ° の角度で下を向けて持ち、フ リット、シール、スプレッダをすべて装着し たエンドフィッティングを戻します。エンド フィッティングを 1 フラット通り越して手で締 めます。...
- Page 17 中文 安装 管路和接头 对于分析柱,建议使用外径为 1/16 英寸、 内径为 0.12 mm 或 0.17 mm 的不锈钢管路进行连接， 对 于 25 mm 的制备柱则使用内径为 0.5 mm 的管 路。 应尽量缩短色谱柱、 检测器之间的管路长度， 并 减小进样量， 以避免因死体积过大而导致系统性能 下降。 应使用 Parker 兼容的 1/16 英寸螺帽和密封 垫圈进行色谱柱连接。 图 1 介绍了色谱柱接头的兼 容性。 图 1. 兼容的接头 标准色谱柱端接头的距离...
- Page 18 中文 洗脱液流速 传统 GPC 色谱柱使用内径为 7.5 和 7.8 mm 的色谱 柱， 大多数分离使用的最佳流速为 1.0 mL/min。 当 色谱柱内径增加或减少时， 应对体积流速做出相应 调整， 以使通过色谱柱时具有相同的线速度。 建议流速如表 所示， 但是， 为了避免过高的压 力， 较高粘度的洗脱液应在较低的流速和较高洗 脱温度下使用。 应逐渐改变流速并限制压力脉冲。 在任何时候都不应超过色谱柱的最大操作压力 （见表 4） 。 表 1. 建议流速 色谱柱 典型流速 (mL/min) 建议流速 (mL/min) 2.1 mm 内径 0.04-0.1 0.06 4.6 mm 内径...
- Page 19 中文 洗脱液 所有洗脱液必须是高纯的， 在使用之前应当过滤 和脱气。 GPC 色谱柱可切换到其他洗脱液。 在切换到其他 洗脱液时， 应重点考虑新洗脱液的兼容性和粘度。 图 3 列出了7.5 mm 内径色谱柱的流动相切换方 法。 对于其他内径的色谱柱， 可参考使用表 1 列出 的流速。 如果使用高粘度洗脱液 （如 TCB、 NMP、 DMF） ， 在 加热或冷却的色谱柱时， 应始终保持较低的流速。 通常， 在升温之前， 7.5 mm 内径色谱柱使用的流 速是 0.2 mL/min， 4.6 mm 内径色谱柱使用的流 速是...
- Page 20 中文 有机色谱柱 （PLgel； PlusPore； PL Rapide） 在乙苯中保存的色谱柱 切换到中粘度溶剂 切换到高粘度溶剂 切换到低粘度溶剂 例如 例如 例如 甲苯 DMF DMSO, THF 氯仿 二氯甲 TCB 间甲酚 NMP HFIP 使用丙酮冲洗色谱 使用丙酮冲洗色谱 将柱温箱设置为 50 柱， 流速为0.5 mL/ 柱， 流速为0.5 mL/ °C， 流速为 0.1 mL/ min， 冲洗 2 个色谱 min，...
- Page 21 宽， “ W5σ” 是 4.4% 峰高处的峰宽， “ L” 是以米为单 位表示的色谱柱长度， “ a” 和 “b” 是在 10% 峰高处 测量的峰顶点两侧的峰宽。 色谱柱柱效由诸多试验因素 （如系统死体积、 洗脱 液、 流速、 测试试剂、 温度等） 决定， 由于这些参数的 变化， 测试结果可能与色谱柱证书上标示的结果不 同。 在使用高效和/或窄径 GPC/SEC 色谱柱时， 峰 展宽的影响尤为严重。 至关重要的是， 为了发挥安 捷伦色谱柱的全部潜能， 必须确保系统的扩散最小 化。 我们建议在首次使用色谱柱组时检测其性能， 并在 之后定期检测。 在柱效低于初始值的 80% 时， 考虑...
- Page 22 中文 存放 色谱柱从系统上拆下来后， 必须重新装上堵头， 以防止色谱柱由于溶剂蒸发而变干， 否则凝胶会 收缩， 填充柱床会被破坏。 只需用手指拧紧堵头即 可。 上面提到的所有洗脱液都适合于保存色谱柱， 但不能使用不稳定的 THF 和卤化溶剂。 若要长期存放水性柱， 应用水冲洗， 并将其保存在 含 0.02% 叠氮化钠的水中。 保修 色谱柱的保修期为交付之日起 90 天。 对于在 170 °C 或 更高温度条件下使用的色谱柱， 保修期缩短 为 30 天。 安捷伦科技公司对于操作不当以及在超过最高操作温 度和压力 （见表 3） 使用的色谱柱不承担任何责任， 并且 保修无效。 要了解完整的保修声明， 请申请安捷伦的通 用销售条件。...
- Page 23 Algumas conexões de outros fabricantes podem não ser compatíveis, por exemplo, da Waters ou Rheodyne. Em caso de dúvidas, fale com a Agilent Technologies. Conexão da coluna Conecte a coluna GPC na direção de fluxo do eluente indicada e aperte a anilha e a porca de 1/16 pol.
- Page 24 Português Vazão de eluentes Em colunas GPC convencionais, que usam colunas de 7,5 e 7,8 mm, 1,0 ml/min é a vazão ideal para a maior parte das separações. Quando o diâmetro interno da coluna é aumentado ou reduzido, a vazão volumétrica é ajustada de forma correspondente para que seja concedida velocidade linear equivalente na coluna.
- Page 25 Português Eluentes Todos os eluentes devem ser de alta pureza e filtrados e desgaseificados antes do uso. As colunas GPC podem ser transferidas para outros eluentes. Ao fazer a transferência para outro eluente, a miscibilidade e a viscosidade do novo eluente são as principais considerações. Veja a Figura 3 para colunas de diâmetro interno de 7,5 mm.
- Page 26 Português PL Multisolvent As colunas do PL Multisolvent são fornecidas em tetra-hidrofurano estabilizado e podem ser transferidas diretamente a solventes orgânicos, ou água pura, e finalmente ao tampão. O tetra-hidrofurano instabilizado (por exemplo, para cromatografia líquida de alto desempenho) não é recomendado como eluente devido ao ataque do peróxido nos géis.
- Page 27 Português Colunas orgânicas (PLgel; PlusPore; PL Rapide) Coluna fornecida em etilbenzeno Transferência Transferência Transferência para solventes de para solventes para solventes de baixa viscosidade de viscosidade alta viscosidade p. ex., média p. ex., p. ex., THF, Clorofórmio, Tolueno, DMF, TCB, m-Cresol, Diclorometano DMSO, HFIP Lavar coluna com...
- Page 28 à variabilidade nesses parâmetros. Os efeitos do alargamento de banda são mais severos quando se utiliza colunas GPC/SEC com diâmetro interno reduzido e/ou de alta eficiência. É essencial garantir que a dispersão do sistema seja minimizada para que a potência máxima das colunas Agilent seja...
- Page 29 Português Tabela 3. Especificações de coluna Coluna Pressão Pressão Temperatura operacional operacional operacional típica psi máxima psi máxima °C (bar) (bar) PLgel 3 µm 750 (50) 2.700 (180) PLgel 5 µm 450 (30) 2.200 (150) PLgel 9 & 10 µm 150 (10) 2.200 (150) PLgel 20 µm...
- Page 30 As colunas são cobertas por garantia de 90 dias após a entrega. Para colunas usadas a ou acima de 170 °C, o período de garantia é reduzido para 30 dias. A Agilent Technologies não se responsabiliza por manuseios inapropriados e por uso de colunas acima de pressão e temperatura operacionais máximas...
- Page 31 Para obter assistência técnica ou para usar o serviço de reparo de colunas, entre em contato com a Agilent Technologies.
- Page 32 Captiva oferece uma ampla gama de opções de formatos e as mais diversificadas soluções disponíveis no mercado hoje. Saiba mais em www.agilent.com/chem/sampleprep © Agilent Technologies, Inc. 2017, 2018 Published in the UK, August 3, 2018 Publication Number: 5991-3792EN Part Number: 5971-6578...