TOSOH BIOSCIENCE Phenyl-5PW Instruction Manual

TOSOH BIOSCIENCE Phenyl-5PW Instruction Manual

Hplc tskgel hic column

Advertisement

Quick Links

INSTRUCTION
MANUAL
HPLC
HIC  Column
TSKgel  Phenyl-5PW,  Ether-5PW

Advertisement

Table of Contents
loading
Need help?

Need help?

Do you have a question about the Phenyl-5PW and is the answer not in the manual?

Questions and answers

Summary of Contents for TOSOH BIOSCIENCE Phenyl-5PW

  • Page 1 HPLC HIC  Column TSKgel  Phenyl-5PW,  Ether-5PW INSTRUCTION MANUAL...
  • Page 2 Safety Precautions    To help protect your property from potential damage and ensure personal   safety, please read this manual thoroughly before using the product. [Notational Conventions]  Notation Explanation WARNING Alerts the user to the potential for serious injury or death. CAUTION AIerts the user to the potential for damage to hardware or bodily harm. WARNING ■ Keep away from fire. Take proper precautions when using flammable solvents. There is the potential   for fire, explosion, or poisoning. CAUTION ■ Use only in well ventilated areas.    In case of insufficient ventilation, flammable and toxic solvents can cause fire,     explosion, or poisoning.  ■ Do not spill solvents.    Spillage and leakage can cause fire, electric shock, poisoning, injury, and corrosion.    When cleaning up a spill, wear appropriate protective gear.  ■ Wear eye protection and protective gloves.    Organic solvents and acids should not come in direct contact with the skin.  ■ Handle package with care.    Inappropriate handling may cause rupturing and splattering.  ■ Only use this product as intended.    This product is for separation and purification, do not use for any other purpose.  ■ Confirm compounds are safe.    Check that obtained compounds and solutions after separation and purification are     safe.  ■ Proper disposal.    Dispose of in accordance with local laws and regulations. NOTE ■ Keep this manual for future reference.     ...
  • Page 3: Table Of Contents

    Table of Contents 1 . Introduction …………………………………………………………… 1 2 . Unpacking …………………………………………………………… 1 3 . Installation   …………………………………………………………… 1 4 . Column Storage    ……………………………………………………… 3 5 . Sample and Eluent Preparation  ……………………………………… 3 6 . Flow Rates    …………………………………………………………… 4 7 . Temperature …………………………………………………………… 5 8 . Guard Column  ………………………………………………………… 5 9 . Column Efficiency    …………………………………………………… 6 10. Troubleshooting   ……………………………………………………… 7 11. Quality Specifications and Warranty  ………………………………… 7...
  • Page 4: Introduction

    1. Introduction TSK-GEL  HIC  colummns  are  prepacked  columns  for  the  separation  of  sample components  according  to  surface  hydrophobicity.  The  separation  mechanism  is similar to that of reversed phase. These columns were designed for analytical and preparative separation of proteins. We have both steel column and glass column. Especially glass column is biocompatible type which consists of a high precise glass tube with lastic end fittings. This Instruction Manual contains crucial information on how to care for and use these columns  in  the  proper  manner,  so  as  to  make  most  effective  use  of  their  high performance capabikities.
  • Page 5 Operating the column with the flow in the reverse diraction for a long time will cause degradation of column performance. Outlet Inlet FLOW End  fitting TY PE End Plug C. No. Name  Plate Fig. 2 Steel Column Parts Inlet Outlet End fitting End Plug Fig. 3 Glass Column Parts 3-3 Prevention of Bubbles Be careful not to admit any bubbles into the column during its installation or removal from the equipment. Always remove all bubbles from all pipings before installing the column. Admitting bubbles into the column will cause degradation of its performance through the occurrence of channeling, etc. 3-4 Prevention of Pulsatory Flow This type of column is easily affected by pulsatory flow of the solvent. Preferably, a pump with no fluctuation should be used. If a pump with pulsation must be used, connect a pulse damper (accumulator) to the outlet side of the pump in order to compensate for the pulsation. The damper must be highly resistant to corrosion. − 2 −...
  • Page 6: Column Storage

    4. Column Storage Store the columns at constant temperature in the range of 4 ℃ to 30 ℃. Don t store these columns below 4 ℃ not to freeze the solvent in the column. Avoid exposing the columns to direct sunlight, and store the columns in a place safe from corrosive gases. If  the  column  is  being  used  daily,  you  need  not  remove  the  column  from  the equipment and the buffer may be left in the column overnight, as long as the buffer salt has good solubility. When the columns are to be stored for a few days, remove the column  from  the  instrument  and  seal  both  ends  with  the  end  plugs.  For  long-term storage, the column must be protected from growth of microorganisms.
  • Page 7: Flow Rates

    0.4-0.8  mL/ min.  The  flow  rates  and  pressure  drops  for  these  columns  are suggested below : Table 1 Recommended  flow  rates Recomended  Max. Pres- Column Max.  Cat. Flow Rate sure Drop Types Dimensions Flow Rate (mmID×cm) (mL/min)  (mL/min)  (MPa) 〈Steel Column〉 07573  phenyl-5PW   7.5×  7.5 0.5−1.0 07656  phenyl-5PW 21.5×15.0 4.0−6.0 〈Glass Column〉 13063  phenyl-5PW  Glass   5.0×  5.0 0.5−0.8 08804  phenyl-5PW  Glass   8.0×  7.5 0.5−1.0 14018  phenyl-5PW  Glass 20.0×15.0 4.0−6.0...
  • Page 8: Temperature

    In such case the original column efficiency can be maintained by connecting a guard column  before  the  column  and  replacing  it  if  efficiency  becomes  degraded  by  the adsorption of material to the guard column. For  mazimum  insurance  against  such  problems,  a  guard  column  should  be  used  as much as possible. We prepared the Guard column kit as the guard columns for TSKgel Phenyl-5PW and Ether-5PW. Please refer to INSTRUCTION MANUAL for TSKguardgel for HPLC . Table 2 Guard  Columns Types Applied Columns Cat. No.
  • Page 9: Column Efficiency

    9. Column Efficiency  The number of theoretical plates of a column (N), the asymmetry factor (As) and their chromatographic conditions are shown in the Inspection Data. 9-1 Method of Calculating the Number of Theoretical Plates 1/2h Injection Fig. 4 Method of Calculating the Number of Theoretical Plates The number of theoretical plates of a column (N) is calculated by the half peak width method shown in Fig.4 and the following equation. N = 5.54(Ve / W 1/2 : Elution volume : Half width value of  peak 1/2 : Peak height 9-2 Method of Calculating the Asymmetry Factor 1/10h Injection Fig. 5 Method of Calculating the Asymmetry Factor The asymmetry factor of column (As) is calculated by the 1 /10 h method. As = b / a 9-3 Dead Volume If  the  dead  volume  of  the  equipment  or  the  injection  volume  of  a  sample  solution becomes too large, the number of theoretical plates may decrease.
  • Page 10: Troubleshooting

    10. Troubleshooting  When  using  TSKgel  columns,  some  problems  can  be  avoided  by  following  these instructions.  But  the  problems  (such  as  those  due  to  columnn  life,  adsorptive materials, production of air bubbles, dried gel, or frozen solvent) can not be corrected once they occur, so care should be taken in handling these columns. 10-1 Clogging of the End Fitting In case the pressure-drop increases or the flow rate decreases, the end fitting should be cleaned by reversing the flow through the column. If  the  clog  cannot  be  removed,  prepare  a  new  end  fitting  and  replace  the  old  end fitting ...
  • Page 11 Glass Column   8.0×  7.5 Glass Column 20.0×15.0 * Detector : UV (280 nm) 11-2 Quality Specifications Column No. of Theo- Asymmetry Cat. Dimensions retical Plates Factor Types (mmID×cmL) (N/Column)   (As) 〈Steel Column〉 07573 TSKgel Phenyl-5PW   7.5×  7.5 ≧1,000 1.0−2.0 07656 TSKgel Phenyl-5PW 21.5×15.0 ≧3,000 0.8−1.6 08641 TSKgel Ether-5PW   7.5×  7.5 ≧1,000 1.0−2.0 08642 TSKgel Ether-5PW 21.5×15.0 ≧3,000 0.8−1.6 〈Glass Column〉...
  • Page 12 Shiba-Koen First Bldg. 3-8-2 Shiba, Minato-ku, Tokyo 105-8623, Japan Phone: +81-3-5427-5180 Fax: +81-3-5427-5220 Web site: http://www.separations.asia.tosohbioscience.com/ HPLC database: www2.tosoh.co.jp/hlc/hlcdb.nsf/StartE?OpenForm TOSOH BIOSCIENCE GmbH TOSOH BIOSCIENCE LLC 3604 Horizon Drive Suite 100, Zettachring 6, 70567 Stuttgart, Germany King of Prussia, PA 19406, USA...

Table of Contents